Cirkulujúce nádorové bunky Circulating Tumor Cells (CTC) Kološtová K, Pintérová D, Bobek V, Janatková I, Prokopová V, Kubecová M, trnáctá V, Kubista M, Barkmanová J, Tesa ová P.
CTC diagnostikované post mortem 1869 A case of cancer in which cells similar to those in the tumors were seen in the blood after death Ashworth T.R., Austr.Med.J. 1869, 14,146
CTC Bunky v periférnej krvi, patriace antigénne alebo geneticky k typom jednotlivých nádorov Zdroj CTC nie je presne definovaný (ložisko primárneho tumoru alebo následok muta ného procesu v kme ových bunkách kostne drene?).
Rakovina a metastázy ( 1% CTC)
Pre o CTC? - Odpove na lie bu: Primárny nádor vs. Metastázy - Stratifikácia skupín pacientov napr. Pozitivita CTC - indikácia k analýze sentinelovej uzliny - pozitivita CTC rádioterapia?
CTC pacientka s CTC bunkami trpí agresívnejšou formou ochorenia prítomnos CTC v krvi a rozdielna expresia onkomarkerov na úrovni mrna v CTC - stanovenie algoritmov skorej detekcie diseminácie (metastáz). ideálny prostriedok monitorovania dynamiky priebehu ochorenia - periférna krv je dostupná a umož uje tak opakovanie vyšetrenia v prípade potreby
AdnaGen Veridex (Cellsearch) nový štandard v lie be rakoviny???? detekcia relapsu s vyššou presnos ou aj v prípadoch, ke ešte štandardné dg.postupy nie sú schopné metastázy detekova
AdnaGen test
Agilent 2100 -upa - PAI-1 -PTEN -PR -ER
Pokrok v diagnostike rakoviny = zisk pre pacienta aj lekára Prognóza: CTC v krvi pred opera ným zákrokom indikujú zvýšené riziko metastáz indikácia k poopera nej chemoterapii
Monitoring v priebehu terapie - efektivita terapie je meraná efektom úbytku CTC v periférnej krvi - ak sa CTC vyskytujú v periférii aj po terapii, je potrebné aplikova alternatívne terapeutické režimy
Skorá detekcia relapsu AdnaGen test detekuje možný relaps nieko ko mesiacov pre inými dg.metódami ( cca. 9 mesiacov) CTC - najsilnejší nezávislý faktor rizika i v porovnaní so sérovými markermi
MUC-1(CA15.3) a CTC 100% 100% Probability of Survival 90% 80% 70% 60% 50% 40% 30% 20% 10% Log rank P =.21 14.2 months (P =.22) 19.5 months Probability of Survival 90% 80% 70% 60% 50% 40% 30% 20% 10% Log rank P =.0041 10.9 months (P =.0064) 26.9 months 0% 0% 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 Time From Baseline (Months) Time From Baseline (Months) Stopeck A, et al. ASCO 2005. Abstract 9516.
Metastatic Breast Cancer MBC je ve mi heterogénna Lie ba je paliatívna Sú asné klinické, laboratórne a rádiologické metódy sú neadekvátne pre Biologickú definíciu nádoru Stanovenie prognózy A dynamické meranie efektu terapie a odpovedi na lie bu
MBC - Metastatic Breast Cancer Axilárne uzliny Kostná dre Periférna krv Prítomnos metastáz v regionálnych lymfatických uzlinách je navýznamnejším prognostickým faktorom
Progression-Free Survival (PFS) 100% 90% Pravdepodobnos PFS 80% 70% 60% 50% 40% 30% 20% 10% 2.7 months 5 CTCs/7.5 ml n = 87 (49%) 7.0 months < 5 CTCs/7.5 ml n = 90 (51%) Log rank P =.0001 0% 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 mesiace Cristofanilli M, et al. N Engl J Med. 2004;351:781-791.
Overall Survival (OS) 100% Probability of Progression-Free Survival 90% 80% 70% 60% 50% 40% 30% 20% 10% 10.9 months 5 CTCs/7.5 ml n = 87 (49%) Log rank P <.0001 < 5 CTCs/7.5 ml n = 90 (51%) 21.9 months 0% Cristofanilli M, et al. N Engl J Med. 2004;351:781-791. 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 Time From Baseline (Months)
CTC výpovedný marker pre stanovenie benefitov v priebehu terapie použite né a nutné pre stratifikáciu rizika CTC u pacientiek s MBC Nezávislý prognostický faktor Vyššia výpovedná hodnota ako pri iných vyšetrovacích metódach Budúcnos Lepšia charakteristika CTC fenotypov (profilovanie génovej expresie pre jednotlivé rizikové skupiny) Presné stanovenie prediktívnej hodnoty aj pre pacientky s primárnym ochorením
Cíle projektu: Sledování exprese gen v cirkulujících nádorových bu kách (CTC) u karcinomu prsu jako sou ást procesu individualizace lé by a asné detekce metastatického procesu Zavedenie štandardných opera ných protokolov pre izoláciu CTC pomocou Adnagen diagnostického systému u pacientek s rakovinou prsníka.
eská Republika Praha Laboratory of Immunology - Oncology VFN a 1. LF UK U nemocnice 2, Prague Faculty Hospital Královské Vinohrady Prague Radiotherapy and Oncology Tumor biology, 3.LF UK, Prague Academy of Sciences Dr. Kubista, Prague Sweden TAATA biocenter
Projekt 1de pred operáciou Chirurgický zákrok 1de po operácii Diagnóza 3 6 9 12 mesiacov Profil expresie sledovaných génov primárneho nádoru
Multiplex PCR GA733-2 MUC-1 HER2neu actin
Alternatívy qrt-pcr
High-Density Microfluidic PCR 48 vzoriek x 48 reakcií x 2 farby 2304 reakcií 10 nl objem reakcie vysoká senzitivita www.fludigm.com
Prežívanie pacientiek s HER2+ CTC Wulfing, P. et al. Clin Cancer Res 2006;12:1715-1720 Copyright 2006 American Association for Cancer Research
akujeme ASCOMED, spol. s r. o. Innogenetics Inc Pod Cihelnou 6/664 161 00 Praha 6 tel.: +420 233 313 578 fax: +420 233 313 582 e-mail: asco@ascomed.cz Egis Praha, spol. s r.o. Ovocný trh 1096/8 110 00 Praha 1 tel: (420) 227 129 111 fax: (420) 227 129 199 DI : CZ63982722