ENTEROBACTERIACEAE CAMPYLOBACTER HELICOBACTER

Prepis

1 ENTEROBACTERIACEAE CAMPYLOBACTER HELICOBACTER

2 ÚLOHY - Enterobaktérie SKUPINA 1 SKUPINA 2 SKUPINA 3 SKUPINA 4 Selektívne a diagnostické pôdy používané na kultiváciu enterobaktérií Raussov fenomén Burriho tušová metóda Určovanie biochemických vlastností enterobaktérií (Hajnova pôda, ENTEROTEST) Dôkaz produkcie ureázy Tvorba indolu Campylobacter jejuni všeobecná charakteristika Campylobacter jejuni ochorenia, laboratórna diagnostika a liečba H. pylori všeobecná charakteristika H. pylori ochorenia, laboratórna diagnostika a liečba

3 MIKROSKOPIA GRAM BURRI

4 Escherichia coli - fakultatívne anaeróbna - gramnegatívna palička, pohyblivá v hrubom čreve teplokrvných živočíchov. Je jedným z najdôležitejších zástupcov črevnej mikroflóry Salmonella) - fakultatívne anaeróbna - gramnegatívna palička, pohyblivá Členenie rodu - revidované, donedávna boli jednotlivé sérotypy považované za samostatné druhy. Genetická analýza - rod obsahuje jediný známy druh, Salmonella enterica, ktorý sa člení na viacero poddruhov.

5 E. coli Proteus Klebsiella (BURRI) Salmonella Shigella

6

7 KULTIVÁCIA Krvný agar Endo agar DC (dezoxycholátcitrátový) agar

8 deoxycholát-citrátovom agare Opuzdrené kmene tvoria hlienovité kolónie plazivý rast, Raussov fenomén : koncentrický rast od jedinej kolónie - nepohyblivá

9 Pohyblivosť P. mirabilis je možné identifikovať aj na základe Raussovho fenoménu. Vyšetrovaný kmeň sa naočkuje do stredu platne s kultivačnou pôdou (krvný agar). Počas kultivácie dochádza k postupnému plazivému narastaniu baktériovej populácie od stredu k okrajom petriho misky. Tento jav sa označuje ako Raussov fenomén.

10 ENDO AGAR Selektivita Endo agaru je vytvorená kombináciou siričitanu a bázického fuchsínu, ktoré potláčajú rast gram-pozitívnych mikroorganizmov. Koliformné baktérie skvasujúce laktózu tvoria ružovo-červené až silno červené vypuklé kolónie, v niektorých prípadoch so zlatým kovovým leskom. Rovnako sa sfarbuje médium okolo kolónií. Mikroorganizmy, ktoré laktózu nefermentujú sú bezfarebné, dobre pozorovateľné oproti ružovému pozadiu pôdy.

11

12 DEZOXYCHOLÁT - CITRÁTOVÝ AGAR (DEOXYCHOLATE CITRATE AGAR) Je to tuhá, selektívna pôda, izolácia patogénnych črevných enterobaktérií rozlišovanie Salmonell a Shigell. Selektivita je dosiahnutá pridaním dezoxycholanu sodného a citronanov, ktorý inhibuje grampozitívne baktérie Enterobaktérie sú diferencované skvasovaním laktózy v pôde. Tvorba kyseliny je indikovaná neutrálnou červeňou, vznikom červeno sfarbených kolónií. Niektoré kmene Salmonell a Proteusov (H2S pozitívne) tvoria na tejto pôde šedé až čierne stredy. Rast E. coli je na tejto pôde čiastočne potlačený, ale niektoré vitálnejšie kmene môžu rásť ako sýtoružové až červené kolónie.

13

14 Testovanie biochemickej aktivity HAJNOVA pôda ENTEROTESTY

15 Hajnova pôda šikmo naliata, tuhá červená pôda na stanovenie biochemických vlastností enterobaktérií. ZLOŽENIE: glukóza, sacharóza, laktóza, železité soli + farebný indikátor ph (fenolová červeň) Zožltnutie pôdy znamená pozitívne skvasovanie. Pôda obsahuje soli Fe, baktérie tvoriace sírovodík spôsobia sčernanie dolnej časti pôdy. Baktérie, ktoré tvoria plyn, spôsobia trhliny, bubliny v pôde. Pôdu očkujeme kľučkou, naočkujeme vždy iba jednu izolovanú kolóniu.

16

17

18 7. Sérotypizácia enterobaktérií Na podložnom sklíčku suspenzia s FR 1) Suspenzia + kvapka polyvalentných sér s + poly 1,2,3 = aggl+ S+ poly 4,5,6 = aggl 2) Suspenzia + kvapka monovalentných sér s + mono 1 = aggl.+ s + mono 2 = aggl s + mono 3 = aggl. Výsledok testovaný kmeň je typ 1

19 Widalova reakcia diagnostika brušného týfusu kultiváciacia (priama diagnostika): - krvi ( deň), - stolice (od 2. týždňa), - kostnej drene, moču (od 3. týždňa) a - zisťovanie aglutinínov v sére - Widalova reakcia (nepriama diagnostika) - - protilátky proti O a H antigénom S. typhi - štvornásobný vzostup titra protilátok - akútne ochorenie alebo na vyhľadávanie nosičov moč stolica sérum krv Znalosti klinického obrazu a patogenézy - Ochorenie začína ingesciou baktérií.inkubačný čas je 1-2 týždne. Pri väčšom inokule sa môže vyskytnúť akútna gastroenteritída. Baktérie prenikajú cez mukózu tenkého čreva ( invázia) endocystózou do submukózy. Množia sa v submukózze a sú vychytávané do lymfatických uzlín, kde sa množia v makrofágoch, dostávajú sa do krvi (perzistujúca bakterémia) a orgánov RES a ostatných orgánov (hemorhagie, kožná rozeola, orgánové komplikácie)

20 Campylobacter - paličkovité, G-, pohyblivé, 11 druhov,7 poddruhov - Vyžaduje mikroerofilné prostredie, teplotu 42*C Campylobacter jejuni : - gastroenteritída, u pacientov so zníženou imunitou - Infikuje sliznicu jejuna, ilea a colon, ktorá je edematózna, krvavá, tvorba krýpt, abscesov.infiltrácia do lamina propria. - enterotoxín, cytoptický toxín, endotoxín - Hydina Campylobacter coli - gastroenteritis, Campylobacter fetus septikémia, artritída, tromboflebitída, meningitida Lab dg : - kultivácia na selektívnych pôdach, mikroskopia, biochemická identifikácia - Terapia: ERY

21 Helicobacter Špirálovité paličky, G-, v súvislosti s B gastritídou, žalúdočným a duodenálnym vredom., príp. Ca Patogenéza produkcia ureázy vytvára oblak amoniaku, ktorý chráni baktériu před účinkom žal. kyseliny, - pohyblivosť, - tvorba mucinázy prienik baktérie do mukóznych vrstiev adherencia prichytenie baktérie na intracelulárne spoje zápal s infiltráciou mononukleárov v lamina propria - uniká prítomným protilátkam IgA svojou lokalizáciou v mukóze. Neexistuje zvierací rezervoár prenos interhumánny Terapia: ATB. Bizmutové soli, nitroimidazol a amoxicilin alebo TTC rs_en.png

22 H. pylori laboratórna diagnostika

23 Zdroje: Kompaníková Jana, Elena Nováková, Martina Neuschlová: Mikrobiológia nielen pre medikov - 2. upravené a doplnené vydanie. Multimediálna podpora výučby klinických a zdravotníckych disciplín :: Portál Jesseniovej lekárskej fakulty Univerzity Komenského [online], [cit ]. Dostupný z WWW: ISSN Murray, P. R., Rosenthal, K. S., & Pfaller, M. A. (2013). Medical microbiology. Philadelphia: Elsevier/Saunders.